ЛАБОРАТОРНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ РАН СО СКУДНЫМ ЗАГРЯЗНЕНИЕМ МИКРООСКОЛКАМИ СТЕКЛА


А.К. Семячков (Тюмень)
 
 
 
Принципиальные вопросы исследования микроосколков стекла (МОС) в судебно-медицинских объектах разрешены достаточно хорошо (Н.И. Шинкарев, 1976). Однако, конкретные «технологические» приёмы или их последовательность обеспечивают удовлетворительные результаты при массивном загрязнении МОС, наличии относительно крупных МОС, отсутствии микрочастиц другого происхождения. В таких случаях достаточно изъять из трупа только кожный лоскут с раной, обнаружить в ней МОС визуально, стереомикроскопически и рентгенологически, извлечь их пинцетом, смыванием-соскабливанием со стенок раны (А.П. Загрядская, 1975), частичной мокрой минерализацией (А.В. Касатеев, И.В. Тищенко, 1986). При этом можно не опасаться утраты части МОС при неоднократном переносе объектов в ходе многоэтапного исследования с одного предмета на другой.
Но чаще в судебно-медицинской практике встречаются объекты со скудным количеством мельчайших МОС, которые не удаётся обнаружить, извлечь и сохранить указанными приёмами. В этих случаях требуется обеспечить полное извлечение МОС, исключить их утрату, избежать загрязнения объекта посторонними микроосколками. Мы предлагаем свою методику, где названные задачи достигаются следующим образом.
Извлечение всех МОС добиваются мокрой минерализацией не только кожного лоскута, но и всех тканей, составляющих стенки и дно раны. Другие варианты извлечения МОС только удлиняют исследование, так как при отрицательных результатах неизбежна последующая минерализация объекта.
Утрату МОС предотвращаем сокращением количества переносов объекта и извлечением из него МОС до: 1. упаковки, в которой рана доставляется из морга в лабораторию; 2. колбы Кьельдаля для минерализации раны; 3. упаковки для хранения и исследования извлечённых МОС. Отчасти это достигается исключением некоторых исследований, заменой на другие. Проведение цветной химической реакции признано нецелесообразным ещё Н.И. Шинкаревым. Фотографирование МОС (А.В. Касатеев, И.В. Тищенко, 1986) мы используем, так как среди прозрачных микрочастиц, сохраняющихся после обработки в концентрированных кислотах, легко выделить стеклянные микроосколки обычными оптическими методами. По этим же причинам исключена поляризационная микроскопия МОС, заключённых в глицерин на предметном стекле. Элементный состав МОС исследуется не кварцевым спектрографом, а на лазерном микроанализаторе ЛМ А-10, для чего достаточно одного микроосколка и не требуется уничтожать МОС растиранием в ступке.
Загрязнение объекта посторонними микроосколками возможно от предметов, содержащих МОС (предметные и покровные стекла, склянки с притертыми пробками, лабораторная посуда со сколами и трещинами), и жидкостей, контактирующих с ними. Поэтому мы сократили использование стеклянных предметов до одного (колба). Из жидкостей удаляем МОС центрифугированием или фильтрованием. Для этого кислоты наливаем в склянки с завинчивающимися крышка­ми, центрифугируем, после этого осторожно (чтобы МОС остались на дне!) переливаем их через горловину склянки в колбу. Неаг­рессивные жидкости (дистиллированная вода, раствор Ратневского, перекись водорода и др.) фильтруем прямо в колбу или пластмас­совую (фарфоровую, металлическую) воронку).
Извлеченные МОС помещаются между листами прозрачной рентген- или фотопленки, что позволяет исследовать их микроскопически, фотографировать без нарушения целости упаковки и неопределенно долго хранить.
Конкретно предлагаемая методика состоит в следующем.
1.     В морге рана, в которой   подозревается наличие МОС, ис­секается в виде кожного лоскута. Если при этом рана оказалась удаленной неполностью, то отдельно иссекается оставшаяся часть - стенки и дно. Объекты направляются в физико-техническое отделе­ние в пластмассовой чашке Петри или бумажном (полиэтиленовом) пакете.
2.     В лаборатории объекты фотографируют, рентгенографируют в мягких лучах и стереомикроскопируют. При необходимости кожный лоскут предварительно восстанавливают в профильтрованном растворе Ратневского, используя чашку Петри, в которой рана доставлена из морга, или другую нестеклянную, например, фарфоровую посуду.
3.     При необнаружении МОС указанными методами объекты разрушают в специально приспособленной колбе Кьельдаля. Переделка колбы заключается в том, что стеклодувом придается боковой стен­ке с одной стороны форма воронки, заканчивающейся трубкой с наружным диаметром 6 мм и длиной 3-5 см. Воронка отходит вниз и в сторону под углом около 120° по отношению к горловине колбы. На стеклянной трубки насаживается пластмассовая прозрачная гибкая трубка длиной 10 см (от систем для взятия крови или трансфузий – после использования по основному назначению). Колба с раной укрепляется в лабораторном штативе так, чтобы горловина колбы и воронка отходили вверх и в стороны под углом 60° к вертикали (фиг. 1).
 
 
 
 

Фиг. 1.
 
Гибкая трубка пережимается хирургическим зажимом. В колбу наливается раствор Ратневского, применявшийся для восстановления (в него могли попасть МОС из раны), и отцентрифугированный свежепри­готовленный раствор серной кислоты и перекиси водорода. Разрушение объекта производим до стадии образования прозрачной жидкости с жирообразным слоем на поверхности. Углублять разложение органи­ческих веществ дальше не имеет смысла, так как на этой стадии МОС уже выделились из разрушенной биоткани и находятся в нижнем слое жидкости. Желательно, чтобы во время разрушения жидкость в колбе не попадала в гибкую трубку.
4. По достижении достаточной глубины разрушения в колбу добавляют профильтрованную дистиллированную воду до уровня внутреннего отверстия горловины. Таким образом, достигается мак­симально возможное разведение кислоты до концентрации, при кото­рой не повреждается   гибкая трубка. Положение колбы изменяется так, чтобы воронка была обращена вниз (фиг. 2).
 

 

Фиг. 2.
 
Через I час на гибкую трубку накладывается второй зажим - примерно на I см выше первого. Колба возвращается в исходное положение. Гибкая трубка пересекается кнаружи от зажимов так, что получается односантиметровый отрезок с пережатыми концами.
5. Заранее изготавливается упаковка для хранения извлечен­ных МОС. Для этого два листа треугольной формы с размером сторон 3 см, вырезанных из незасвеченной и отфиксированной рентген- или фотопленки, скрепляем между собой нагреванием, с помощью органического растворителя или клеем так, чтобы одна сторона треугольного пакета осталась открытой. Отрезок гибкой трубки располагаем вертикально   над приготовленным пакетиком, обращенным открытой стороной вверх. Последовательно снимаются верхний и нижний зажимы. Жидкость из отрезка смещается вместе с осадком в упаковку. Основной объем жидкости из упаковки отса­сывается осторожным погружением в нее полоски фильтровальной бумаги. Оставшаяся жидкость удаляется испарением при комнатной температуре. После этого упаковка герметизируется.
Наш метод может быть использован для обнаружения в биоло­гических объектах и других легко оседающих микрочастиц - диатомеи, кварцсодержащие минералы и др.