Рекомендованное методическими письмами Главного су­дебно-медицинского эксперта МЗ СССР (1961)[1] и Бюро глав­ной судебно-медицинской экспертизы МЗ РСФСР (1972)[2] выделение диатомового планктона из крови и внутренних орга­нов путем разрушения достаточно трудоемко, требует значи­тельных навесок объектов, позволяет выявлять только те эк­земпляры планктона, которые выдерживают действие кислот, кипячение, озоление и т. л. Стремясь сохранить наибольшее количество различных форм планктона, некоторые исследова­тели рекомендуют более щадящие методы его обнаружения. В качестве объекта исследования при этом чаще всего исполь­зуется кровь. Так, С. И. Поповым предложено выделение план­ктона из крови смесью жидкостей с различным удельным весом (1966), отстаивание гемолизата над покровным стеклом с целью осаждения на него элементов планктона (1972), а так­же исследование наложений под малым увеличением непосред­ственно на интиме крупных артерий (1975).

Однако нам представляется, что в этом отношении исчерпаны не все возможности. Руководствуясь отмеченным и полагая, что для экспертной практики важен такой метод, который позволит обнаруживать максимальное количество планктона при минимальных сроках исследования мы решили испытать целесообразность использования с указанной целью мем­бранных фильтров. На возможность их применения для выде­ления диатомового планктона из крови указывал Н. Г. Шалаев (1969).

Поставлено 104 опыта, в которых ультрафильтрации подвергалась кровь от 12 трупов лиц, утонувших в пресной воде. Гемолизат фильтровался через мембранные фильтры под вакуумом с последующим приготовлением постоянных микропрепаратов. В качестве фильтровального прибора с равным успехом были использованы фильтр-воронка Ф-30, фильтровальный аппарат типа Гольдмана-Семенова фабричного изготовления, кустарный аппарат типа Тиссена. Разрежение создавалось водоструйным насосом, но иногда применялись и другие приспособления (шприц Жане, воздушный ручной насос, хирургический переносный электроотсасыватель, насос Комовского). Устройство собиралось таким образом, чтобы жид­кость, оттекающая из фильтровального прибора, поступала в колбу Бунзена, в которой создается вакуум.

Стандартные мембранные фильтры имеют диаметр 35 мм, толщину 0,1 мм, средний размер пор 0,3 (№ 1), 0,5 (№ 2), 0,7 (№ 3), 0,9 (№ 4), 1,2 (№ 5) и 3—5 (№ 6) микрон. Для осво­бождения от загрязнений, остатков растворителя и пузырьков воздуха их кипятят по 20 минут в двух порциях дистиллирован­ной воды и до использования оставляют во второй порции. Ки­пячение не должно быть бурным, иначе фильтры свертывают­ся в трубочку. Непосредственно перед использованием фильтр извлекается пинцетом из воды, укладывается на пористый диск фильтровального прибора или на гладкую поверхность само­дельной жесткой сетки и зажимается в фильтровальном при­боре.

Трупная кровь разводилась дистиллированной водой, и для предотвращения образования аморфного осадка, забивающе­го поры фильтра, в нее добавлялось несколько капель неразведенного аммиака. Гемолизат наливали на мембранный фильтр, создавали разрежение, которое поддерживали не более 2—3 часов до просасывания всей жидкости. В первые 5-10 минут фильтрование идет быстро, затем резко замедляется. В наших опытах объем фильтруемой жидкости колебался от 5 до 100 мл, в среднем составлял 30 мл. Использовать большие количества нецелесообразно из-за удлинения процесса фильт­рования и загрязнения фильтра. Пигменты крови окрашивают фильтр в зависимости от количества ее в желтый, красный или коричневый цвета различной интенсивности.

Мембранный фильтр извлекался из прибора, подсушивал­ся на воздухе, разрезался па части под размер имеющихся по­кровных стекол. Препараты включались в канадский баль­зам. При микроскопии в проходящем свете на желто-красном фоне фильтра  видны элементы  планктона, в том числе и хлорофиллсодержащие. Планктон обнаружен во всех случаях, количество его на одном фильтре колебалось oт 2-3 до нескольких десятков экземпляров.

Для проверки чистоты используемых мембранных фильт­ров, дистиллированной воды и  аммиака ставились параллель­но контрольные опыты, в которых кровь не участвовала. Кро­ме того, предлагаемым методом исследована кровь от 15 от трупов лиц, скончавшихся скоропостижно. В этих сериях опытов планктон не обнаружен.

Таким образом, проведенные опыты показали, что с по­мощью ультрафильтрации можно выделять планктон из кро­ви, не применяя разрушающих воздействий, сократив при этом время исследования и количество необходимой крови. Преиму­ществом метода являются его техническая простота, сокраще­ние продолжительности исследования, которое может быть вы­полнено в течение нескольких часов одного рабочего дня, и не­обходимого количества крови до нескольких десятков милли­литров.

---